hSyn启动子,也称为hSyn1启动子,从人突触素蛋白1(Synapsin1)的启动子区克隆得到,长度为0.5kb左右,神经元特异表达。
DIO,或者称DiO (Double-floxedinverse Orientation),是和Cre配合控制目的基因表达的元件,一般由两对互不相容的Lox序列组成,特征序列是Lox2722r-间隔1-LoxP-GOIr-Lox2722-间隔2-LoxPr。当有Cre存在时,任一对Lox序列都有可能发生重组,因为每对Lox都是相反方向的,所以重组会导致他们之间的序列发生颠倒,例如Lox2722先发生重组会形成Lox2722r-GOI-LoxPr-间隔1r-Lox2722-间隔2-LoxPr,这时两个LoxP的方向由之前的相反变成相同,它们之间发生第二次重组就会使Lox2722缺失,形成Lox2722r-GOI-LoxPr,由于Lox2722r和LoxPr之间不能发生重组,目的基因的位置就固定下来。LoxP先发生重组,结果也是一样的。通常我们会插入目的基因使它的序列和启动子相反,也就是刚开始的时候不表达,Cre作用后目的基因开始表达。DIO和FLEX是非常接近的,除了所用的间隔1和间隔2序列有所不同。
hM4D(Gi)是从人毒蕈碱乙酰胆碱受体M4上改造的仅对CNO(clozapine-N-oxide)有反应的人工受体(DREADD),不再受乙酰胆碱激活。在一些神经元里,CNO结合hM4D后,激活Gi蛋白偶联的内向钾离子通道GIRK,使得细胞膜超极化,抑制神经元细胞动作电位发放。在不表达GIRK或是Gi的细胞中,hM4D的功能会有所不同。