hEF1a启动子,从人翻译延伸因子1A1(eukaryotic translation elongation factor 1 alpha 1(EEF1A1))的启动子区克隆得到,长度为1.3kb,组成型表达,无细胞组织特异性。
fDIO,或者称fDiO (Flpcontroled Double-floxed inverse Orientation),是和Flp配合控制目的基因表达的元件,一般由两对互不相容的Frt序列组成,特征序列是Frt-间隔1-Frt5-GOIr-Ftrr-间隔2-Frt5r。当有Flp存在时,任一对Frt序列都有可能发生重组,因为每对Frt都是相反方向的,所以重组会导致他们之间的序列发生颠倒,例如Frt先发生重组会形成Frt-GOI-Frt5r-间隔1r-Frtr-间隔2-Frt5r,这时两个Frt5的方向由之前的相反变成相同,它们之间发生第二次重组就会使Ftrr缺失,形成Ftr-GOI-Frt5r,由于Frt和Frt5之间不能发生重组,目的基因的位置就固定下来。Frt5先发生重组,结果也是一样的。通常我们会插入目的基因使它的序列和启动子相反,也就是刚开始的时候不表达,Cre作用后目的基因开始表达。
hM4D(Gi)是从人毒蕈碱乙酰胆碱受体M4上改造的仅对CNO(clozapine-N-oxide)有反应的人工受体(DREADD),不再受乙酰胆碱激活。在一些神经元里,CNO结合hM4D后,激活Gi蛋白偶联的内向钾离子通道GIRK,使得细胞膜超极化,抑制神经元细胞动作电位发放。在不表达GIRK或是Gi的细胞中,hM4D的功能会有所不同。