hSyn启动子,也称为hSyn1启动子,从人突触素蛋白1(Synapsin1)的启动子区克隆得到,长度为0.5kb左右,神经元特异表达。
FAS序列是Lox序列的一种突变体,能够被Cre识别并与其它FAS序列进行重组。当两个顺向的FAS序列同时出现在载体上,遇到Cre后,FAS之间的序列会被切除,目的基因不再表达。这种设计方式又被称为FAS-DO或是FAS。FAS-DO结构和常用的DIO或DO结构是兼容的,不会相互影响。
DO (Double-floxed Orientation),是和Cre配合控制目的基因表达的元件,一般由两对互不相容的Lox序列组成,特征序列是Lox2722r-间隔1-LoxP-GOIr-Lox2722-间隔2-LoxPr。当有Cre存在时,任一对Lox序列都有可能发生重组,因为每对Lox都是相反方向的,所以重组会导致他们之间的序列发生颠倒,例如Lox2722先发生重组会形成Lox2722r-GOIr-LoxPr-间隔1r-Lox2722-间隔2-LoxPr,这时两个LoxP的方向由之前的相反变成相同,它们之间发生第二次重组就会使Lox2722缺失,形成Lox2722r-GOIr-LoxPr,由于Lox2722r和LoxPr之间不能发生重组,目的基因的位置就固定下来。LoxP先发生重组,结果也是一样的。通常我们会插入目的基因使它的序列和启动子一致,也就是刚开始的时候表达,Cre作用后目的基因不表达。
hM3D(Gq)是从人毒蕈碱乙酰胆碱受体M3上改造的仅对CNO(clozapine-N-oxide)有反应的人工受体(DREADD),不再受乙酰胆碱激活。在一些神经元里,CNO结合hM3D后,激活Gq蛋白偶联的磷酸酶PLCβ,引起PIP2被降解,从而使得被PIP2关闭的KCNQ外向钾离子通道被打开,以至于细胞膜去极化,形成动作电位。在KCNQ或是Gq不表达的神经元里,hM3D的功能可能会有所不同。