ChIEF,是ChR1和ChR2两个蛋白的融合体,同时在170位的Ile突变为Val。这个蛋白的特点是长时间光照下,平台期电流和峰值电流的比值较大,也就意味着光照下通道的失活较少,适合长时间刺激。Ile的突变加快了通道的关闭速度,使得ChIEF适合做高频的刺激使用。Karl实验室比较过ChIEF和hChR2(E123A)在parvalbumin神经元中做高频刺激,效果相当。oChIEF是经过密码子优化的版本。
hEF1a启动子,从人翻译延伸因子1A1(eukaryotic translation elongation factor 1 alpha 1(EEF1A1))的启动子区克隆得到,长度为1.3kb,组成型表达,无细胞组织特异性。
fDIO,或者称fDiO (Flp controled Double-floxed inverse Orientation),是和Flp配合控制目的基因表达的元件,一般由两对互不相容的Frt序列组成,特征序列是Frt-间隔1-Frt5-GOIr-Ftrr-间隔2-Frt5r。当有Flp存在时,任一对Frt序列都有可能发生重组,因为每对Frt都是相反方向的,所以重组会导致他们之间的序列发生颠倒,例如Frt先发生重组会形成Frt-GOI-Frt5r-间隔1r-Frtr-间隔2-Frt5r,这时两个Frt5的方向由之前的相反变成相同,它们之间发生第二次重组就会使Ftrr缺失,形成Ftr-GOI-Frt5r,由于Frt和Frt5之间不能发生重组,目的基因的位置就固定下来。Frt5先发生重组,结果也是一样的。通常我们会插入目的基因使它的序列和启动子相反,也就是刚开始的时候不表达,Cre作用后目的基因开始表达。