CAG启动子,是CMV启动子(C),鸡β-肌动蛋白内含子(A)和兔β-珠蛋白的内含子区的组合体(G)。它是一个强启动子的组成型启动子,没有细胞组织特异性。
FLEX,或者称FLEx (“flip-excision”),是和Cre配合控制目的基因表达的元件,一般由两对互不相容的Lox序列组成,特征序列是Lox2722r-间隔1-LoxP-GOIr-Lox2722-间隔2-LoxPr。当有Cre存在时,任一对Lox序列都有可能发生重组,因为每对Lox都是相反方向的,所以重组会导致他们之间的序列发生颠倒,例如Lox2722先发生重组会形成Lox2722r-GOI-LoxPr-间隔1r-Lox2722-间隔2-LoxPr,这时两个LoxP的方向由之前的相反变成相同,它们之间发生第二次重组就会使Lox2722缺失,形成Lox2722r-GOI-LoxPr,由于Lox2722r和LoxPr之间不能发生重组,目的基因的位置就固定下来。LoxP先发生重组,结果也是一样的。通常我们会插入目的基因使它的序列和启动子相反,也就是刚开始的时候不表达,Cre作用后目的基因开始表达。FLEX和DIO是非常接近的,除了所用的间隔1和间隔2序列有所不同。
ChIEF,是ChR1和ChR2两个蛋白的融合体,同时在170位的Ile突变为Val。这个蛋白的特点是长时间光照下,平台期电流和峰值电流的比值较大,也就意味着光照下通道的失活较少,适合长时间刺激。Ile的突变加快了通道的关闭速度,使得ChIEF适合做高频的刺激使用。Karl实验室比较过ChIEF和hChR2(E123A)在parvalbumin神经元中做高频刺激,效果相当。oChIEF是经过密码子优化的版本。